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植物组织培养苗褐化的原因及方法

  1.褐化现象

  

  植物组织培养箔褐化是指在接种后.其表面开始变为褐色,有时甚至会使整个培养基变为褐色的现象.它的出现是由于梢物组织中的多酚氧化酶被激活.而使细孢的代谢发生变化所致·在褐变过程中,会产生酣类物质,它们多呈棕褐色,当扩散到培养基后.就会抑制其他酶的活性.从而影响所接种外植体的培养。

  

  2,褐化的主要原因

  

  I)品种

  

  研究表明,品种间的褐化现象是不同的。由于多酚氧化酶活性上的差异,因此有些品种的外植体在接种后较易褐变,而有些花卉品种的外植体在接种后不易喝变·故在培养过程中应该有所选择,对不同的品种分别进行处理·


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  2)生理状态

  

  外植体的生理状态不同,在接种后褐变程度也有所不同·一般来说,幼嫩的组织在接种后褐变程度并不明显,而老熟的组织在接种后褐变程度较为严重·

  

  3)培养基成分

  

  浓度过高的无机盐会使褐变程度加深,此外,细胞分裂素的浓度过高也会刺激某些外植体的多酚氧化酶的活性,从而使褐化现象加深、,

  

  4)培养条件不当

  

  如光照过强、温度过高、培养时间过长等,均可使多酚氧化酶的活性提高,从而加速被培养的外植体的褐变。


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  3,预防措施

  

  1)选择合适的外植体

  

  一般来说,最好选择处于旺盛生长的外植体,这样可以使褐化现象明显减轻。

  

  2)合适的培养条件

  

  无机盐成分、植物生长调节剂浓度、适宜温度、及时继代培养均可以减轻材料的褐化现象.

  

  3)使用抗氧化剂

  

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  在培养基中,使用半胱氨酸、抗坏血酸等抗氧化剂能够较为有效地避兔或减轻很多外植体的褐化现象·另外使用1%、0巧%活性炭对防止褐变也有较为明显的效果。

  

  4)连续转移

  

  对容易褐变的材料可间隔]2~24h的培养后,再转移到新的培养基上,这样经连续处理7~]0天后,褐化现象便会得到控制或大为减轻·

  

  (三)植物组织培养苗玻璃化的原因及控制

  

  当柏物材料不断地进行离体繁殖时,有些培养物的嫩茎.叶片往往会呈半透明水迹状,这种现象通常称为玻璃化.玻璃苗是指外表呈现玻璃状,茎叶透明的畸形试管植物。


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